然而，1940年5月，周恩来从莫斯科回国，带来了季米特洛夫希望尽力保持国共合作局面的意见。6月，法国战败，英国本土开始受到进攻，英、法失去了干预东方事务的可能性。注意到这种情况，毛泽东估计蒋介石将“被迫让步”，“在不妨碍其阶级利益即政权的范围内，延长合作抗日时间”。因此，他同意为减少军事磨擦，与国民党进行划界谈判。他明确表示：“争取划界，我们不超出界外，避免同国民党引起大的冲突，以减少国民党的恐惧情绪，争取抗战时间的延长”。

相信以蒋介石为代表的中国带买办性的大资产阶级是靠英法等帝国主义的支持而存在的，这是毛泽东在英法两国失去东顾能力之后判断蒋介石必定要向共产党妥协的基本依据。然而，7月16日，国民党提出所谓《中央提示案》，明确规定八路军、新四军必须在一个月之内全部开赴旧黄河以北，并且只允许八路军编六个师，新四军编两个师，其余数十万部队一律遣散。这不能不让毛泽东再度深感困惑。

8月16日，中共中央召开会议分析国际局势，会上已经开始提到蒋介石有没有转向日本寻求和平可能的问题。但这也仅仅是推测而已，并没有什么可靠的凭证。因此，毛泽东固然同意划界，但强调必须以新黄河为线，并且新四军实际上不能向北集中。殊不料条件提出后，国民党竟毫无商量余地。当新四军江北陈毅部在八路军黄克诚部援助下，反击韩德勤八十九军的压迫大获成功，歼敌三旅之众，在华中形成了大片根据地，国民党方面老羞成怒，一面发布密令监视周恩来等，并准备密捕四川所有中共人员，一面于10月19日以何(应钦)、白(崇禧)皓电的形式，干脆发出最后通牒，限令中共军队于一个月内按《中央提示案》要求全部开赴旧黄河以北的指定地区。

在共产党已经强大到有50余万军队、60万党员、控制着华北敌后的大部分地区和华中部分地区的情况下，蒋介石到底有什么资本能够向共产党下最后通牒呢?难道是因为9月27日德、意、日三国结成军事同盟，蒋介石想步汪精卫的后尘?但是，毛泽东还是怀疑，作为英美派大资产阶级代表的蒋介石，是否真的会那么轻易地离开英美集团去加入德意日集团。

10月中旬，中共中央相继得到消息，美国已经提供给蒋介石一笔2500万美元的贷款，英国也开放了一度因受日本压迫而关闭的滇缅路，以便利向中国运送抗战物资。周恩来亦多次来电强调蒋介石国民党加入英美集团的可能，并判断，如英美集团战胜，则国内形势将更形逆转。南方局20日发回的政治情报也断定：蒋介石还是英美派，其加紧反共反苏，是“放弃独立战争，加入英美同盟的具体准备步骤”。

毛泽东早就赞同这一判断，并在10月12日就有电报说明：“蒋在英美策动下可能加入英美战线”。但进至10月下旬，注意到蒋介石确有动武可能，他又不能不对前此的判断有所疑惑，而认为大资产阶级未必会马上加入英美集团。

25日，毛泽东起草了一封很长的电报，估计“德不攻英伦，必向非洲、印度，英国快到手忙脚乱之时。日本将取先占南洋，后扫中国政策，香港、新加坡、仰光、荷属四地一旦落入日本之手，中国英美派又将手忙脚乱”。美国准备未周，不一定很快作战。只要日美战争迟迟不爆发，大资产阶级就只能动摇于英美路线与法国投降派贝当路线之间，“仍不敢过于得罪苏联，全面反共的决心也不容易下”。只是，万一美国参战，并打败日本，“美国把中国英美派从财政上军事上武装起来，中国由日本殖民地变为美国殖民地，国共合作变为大规模内战，最黑暗莫过如此”。

但这后一种情况是不是马上就会发生呢?何况美国也未必就一定能够迅速战胜日本。如果蒋介石还在犹豫，他又怎么会如此迫不及待地向中共发出“哀的美顿书”呢?

反复研究陆续得到的外电后，毛泽东当天又发出电报，认为“德国仍在准备攻英伦，即使不攻英伦，但埃及、土耳其、阿拉伯、伊拉克必落人德军之手，日本必攻香港、新加坡、仰光及荷印，总之英国倒霉时期快到了，不论美国是否迅速参战，英国倒霉是定了的，美国迅速参战也无救于英国倒霉，因此中国英美派也是要倒霉的”。据此，他估计：“国民党现在发动的反苏反共新高潮，一方面是放弃独立战争参加英美同盟的准备步骤，其目的在为参加英美同盟肃清道路，好把民族资产阶级、上层小资产阶级拉过去，一方面也有向日本示意的作用，国民党愿意替日本担负镇压中国民族革命的责任，以求交换日本对国民党的让步，同时又将加入英美同盟吓日本，以求日本的让步。”